Sinteza kimike e ADN-së bazohet në strategjinë e sintezës së fazës së ngurtë dhe kiminë e fosforamiditit.Ndryshe nga sinteza biologjike e ADN-së, materiali në sintezën kimike të ADN-së është DMT (4, 4-dimetoksitritil) dhe deoksiriboksizidi i modifikuar me fosforamidit, siç tregohet në figurën 1. Sinteza e ADN-së kryhet në suportin e ngurtë (mund të ofrojmë të ndryshmeKolona e Sintezës Oligo), pra CPG (xhami me pore të kontrolluar) dhe PS (polistireni), dhe e gjithë sinteza kryhet në njëSintetizues ADN/ARN, e cila është pajisja jonë kryesore, ka modele të ndryshme si: Sintetizues me një kanal HY, HY-12, HY-192 etj., drejtimi i sintezës është nga 3' në 5', dhe një nukleotid futet në suportin e ngurtë nëpërmjet një. cikli i sintezës.Një cikël zakonisht sinteze përmban katër hapa, Dembrojtje, Bashkim, Mbulim dhe Oksidim (Figura 2).Deprotection është vendosur për të hequr grupin DMT në suportin e ngurtë ose grupin hidroksil 5' në nukleozidin e mëparshëm, acidi trikloroacetik 3% në diklorometan përdoret si reagent dembrojtës.Më pas deoksiriboksizidi i modifikuar me fosforamidit u lejua të ekspozonte grupin hidroksil me ndihmën e aktivizuesit, pra 5-etiltiotetrazol ose 4, 5-dikanoimidazol, duke formuar fosfitriesterin (III) dhe realizoi hapin e bashkimit.Një hap mbulimi kryhet për të bllokuar grupin hidroksil të pareaguar gjatë hapit të bashkimit, për të minimizuar formimin e sekuencave të padëshiruara të defektit.Së fundi, fosfitriesteri i paqëndrueshëm (III) oksidohet në fosfortriester kimik të qëndrueshëm (V) me jodin si oksidant në praninë e piridinës.
ADN-ja e sintetizuar mund të shkëputet nga mbështetja e ngurtë me anë të aminolizës, grupi i mbrojtur me 2-cianoetil në fosfortrister dhe amidi në nukleobazë shkëputet në të njëjtën kohë, pllakat e sintezës dhe kolonat e sintezës në rafte vendosen direkt në dhomën e reagimit. tëPajisjet e dembrojtjes.ADN e papërpunuar mund të përgatitet me HPLC, elektroforezë dhe OPC sipas kërkesës, ne gjithashtu mund t'ju ofrojmëPajisjet e pastrimitpër post-përpunim.
Figura 1. Struktura kimike e dABzfosforamidit.
Figura 2. Mekanizmi i sintezës kimike të ADN-së.
Koha e postimit: Gusht-09-2022